一、设备和材料

1）CommaVac^® CommaMix 多功能混匀仪
2）CommaSep^® PRP 磷脂去除柱
3) CommaSep^® PPT 蛋白沉淀过滤板

二、仪器条件

仪器：FH-6000MD UPLC-MS/MS
色谱柱：Hypersil Gol.D aQ (2.1mm×100 mm, 1.9 μm)
柱温：35 ℃
样品温度：10 ℃
进样量：5 μL
流动相：A：Buffer A B：Buffer B
洗脱方式：梯度洗脱

表 1 流动相梯度洗脱条件

离子化方式：ESI+ 电喷雾电压：3500 V
鞘气压力：40 arb 辅气压力：2 arb
离子传输管：350 ℃ 辅气温度：320 ℃
采集方式：Precursor Ion Scan ( 子离子 184 m/z，母
离子范围 184~1000 m/z)

三、实验步骤

1、样品提取
1） 将 CommaSep^® PPT 96 蛋白沉淀过滤板置于 96 孔收集板上，加入 400 μL 沉淀剂。
2） 将 100 μL 血清样本分装加入到 96 孔蛋白沉淀过滤板各孔中。
3） 将蛋白沉淀板上端各孔封膜后，置于多功能混匀仪上，调节转速到 2000 rpm，充分混合 2 min，然后静置10 min，待蛋白沉淀完全。
4） 3000 rpm离心2 min，收集过滤液到96孔收集板中，待净化。
2、样品净化
1）活化： 向CommaSep^® PRP及各品牌去磷脂产品（规格均为 60 mg/1 mL）中加 2 mL 甲醇，弃去流出液。
2）净化： 取上述样品提取步骤，经过血清蛋白沉淀过滤后的收集液，过磷脂去除产品，收集流出液，过 0.22 μm 有机滤膜，上机分析。

四、实验结果

表 2 不同品牌的磷脂去除产品对比效果

结论：经过 UPLC-MS/MS 检测分析，逗点生物磷脂去除产品与市面类似产品的磷脂去除效果相当，均可满足测试要求。

五、订购信息